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3-19
摘要HBV全基因質粒并轉染人滋養細胞,利用膠體金探針標記技術追蹤HBsAg的表達與定位。實驗采用威尼德電穿孔儀完成細胞轉染,結合免疫熒光及透射電鏡觀察HBsAg動態分布。結果表明,膠體金探針可高效示蹤HBsAg的胞內轉運路徑,為HBV感染機制研究提供可視化技術手段。引言乙型肝炎病毒(HBV)感染是導致慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要病因之一。HBsAg作為HBV的主要表面抗原,其表達與分泌機制對病毒傳播及宿主免疫逃逸至關重要。目前,針對HBsAg的示蹤研究多依賴熒光標記技術,但存...
3-18
摘要轉染SCF基因至NK細胞系,探討其對細胞增殖、細胞毒性及遷移能力的影響。采用威尼德電穿孔儀完成基因導入,結合流式細胞術、CCK-8法和Transwell實驗評估功能變化。結果顯示,SCF轉染顯著增強NK細胞增殖活性(p引言自然殺傷(NK)細胞作為先天免疫系統的重要組成部分,在腫瘤免疫監視和抗病毒感染中發揮關鍵作用。然而,NK細胞在體外擴增效率低、存活時間短等問題限制了其臨床應用。干細胞因子(SCF)是一種多功能細胞因子,通過與c-Kit受體結合,參與造血干細胞存活、增殖及...
3-18
摘要雙順反子表達載體,實現兩種功能基因的協同表達,并優化細胞轉染與分選流程。利用威尼德電穿孔儀完成高效轉染,結合熒光標記與流式分選技術,驗證載體在哺乳動物細胞中的表達效率。實驗結果表明,雙順反子載體顯著提高共表達效率,為多基因功能研究提供可靠工具。引言雙順反子載體因其可同時表達多個基因的特性,在基因治療、信號通路研究及合成生物學領域備受關注。傳統單順反子載體需多次轉染或復雜拼接,效率低且穩定性差。本研究旨在設計一種基于內部核糖體進入位點(IRES)或自切割多肽(P2A)的雙順...
3-18
摘要cMet基因的siRNA慢病毒載體,并通過穩定轉染篩選獲得高效抑制cMet表達的細胞模型。實驗采用分子克隆技術設計特異性siRNA序列,利用威尼德電穿孔儀完成病毒包裝,經熒光標記篩選及Westernblot驗證,成功獲得穩定轉染細胞系。結果顯示,cMet蛋白表達顯著降低,為后續功能研究提供了可靠工具。引言cMet基因編碼的肝細胞生長因子受體(HGFR)在腫瘤侵襲、轉移及耐藥性中發揮關鍵作用。其異常激活與多種癌癥不良預后密切相關,因此靶向cMet的基因沉默技術成為研究熱點。...
3-18
摘要:分子克隆技術構建人CD160基因過表達載體,利用威尼德電穿孔儀轉染HEK293T及Jurkat細胞系,篩選獲得穩定轉染細胞株。通過流式細胞術、CCK-8增殖實驗及Transwell遷移模型系統分析CD160對細胞增殖、凋亡及遷移能力的影響。結果顯示CD160過表達顯著抑制T淋巴細胞活化并促進腫瘤細胞遷移,Westernblot證實其通過調控PI3K/AKT信號通路發揮作用,為免疫調控機制研究提供新模型。引言:CD160作為免疫球蛋白超家族成員,在T/B淋巴細胞表面特異性...
3-18
摘要蝎毒多肽對慢性粒細胞白血?。–ML)細胞中BCR-ABL融合基因的抑制作用及其分子機制。通過體外細胞實驗結合分子生物學技術,發現蝎毒多肽可顯著下調BCR-ABLmRNA及蛋白表達,誘導細胞凋亡并抑制增殖,其作用可能與調控PI3K/AKT信號通路相關。實驗采用威尼德電穿孔儀、紫外交聯儀等設備,為靶向治療CML提供潛在策略。引言慢性粒細胞白血?。–ML)是一種由BCR-ABL融合基因驅動的血液系統惡性腫瘤,其異常激活的酪氨酸激酶活性導致細胞增殖失控。目前,酪氨酸激酶抑制劑(T...
3-14
摘要基因表達譜芯片技術,系統分析β干擾素轉染人源細胞后反式調節基因的表達變化。通過威尼德電穿孔儀實現高效轉染,結合威尼德分子雜交儀完成基因表達譜檢測,篩選出差異表達基因并進行功能富集分析。實驗驗證表明,β干擾素顯著調控多個參與免疫應答和信號轉導的基因,為闡明其抗病毒及免疫調節機制提供了新依據。引言β干擾素(IFN-β)是一類具有抗病毒、抗增殖及免疫調節功能的多效細胞因子,其生物學效應主要通過激活JAK-STAT信號通路并誘導下游基因表達實現。然而,β干擾素對細胞基因組的全局性...
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摘要人巨細胞病毒(HCMV)基因重組質粒,利用威尼德電穿孔儀轉染人成纖維細胞,結合熒光定量PCR、Westernblot及共聚焦顯微技術,系統分析HCMV在基因編輯細胞中的復制動態。結果顯示,HCMVIE2蛋白顯著調控病毒DNA合成,且宿主細胞NF-κB信號通路參與復制調控。HCMV致病機制提供了新視角。引言人巨細胞病毒(HCMV)是一種廣泛傳播的β-皰疹病毒,可引發免疫功能低下患者嚴重并發癥。其復制機制復雜,涉及病毒基因與宿主因子的多重互作。近年研究表明,病毒立即早期蛋白(...